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            DNA提取技術服務是怎樣子的呢?

            發布時間: 2022-05-29  點擊次數: 366次
             
              DNA提取技術服務是一種使用破壁酶(Lyticase)消化去除酵母細胞壁,然后采用一種新型的酵母質粒純化柱實現從酵母細胞中進行小量質??焖俪樘岬脑噭┖?。
              1、無需酚氯仿抽提,無需酒精沉淀,12個樣品只需約1-1.5小時即可完成。
              2、試劑盒提供了破壁酶(Lyticase),酵母收集后,加入Lyticase消化去除細胞壁,接著采用傳3統堿裂法裂解細胞,然后將獲得的上清液轉移至結合柱結合DNA,經過離心快速洗滌,最后用洗脫液洗脫出酵母質粒DNA。
              3、由于采用了高濃度的破壁酶,無需再使用玻璃珠,可以避免因為玻璃珠的機械作用帶來的酵母基因組DNA污染。
              DNA提取技術服務本實驗方法的基本原理是,在高鹽狀態下,硅膠膜專一性地吸附DNA;而在低鹽或水溶液狀態下,DNA被洗脫下來。此法簡便快捷,可在30分鐘內同時提純二十多個樣品。從3~5ml培養過夜的含高拷貝質粒的菌液中可以獲得10~20μg高純度的質粒DNA,用于酶切、轉化、DNA自動測序和手工測序等。
              DNA提取技術服務純化柱可以結合的質粒量的上限約為20微克。質粒DNA的產量依賴于酵母攜帶質粒的拷貝數,酵母菌株以及生長條件。通常酵母質粒的拷貝數較低,1.5-5ml培養過夜的酵母抽提獲得的質粒DNA量約為1-3微克左右。高拷貝酵母質粒抽提時的得率會大大提高。抽提所得質粒的量與酵母培養濃度、質??截悢?、酵母品系等因素有關。
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